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目的 研究一种简便、灵敏的单核苷酸多态性(SNP)分型方法,使其能够在简单实验条件下进行常规的临床样本检测.方法 设计针对突变位点的检测探针,通过检测探针的连接、通用扩增、标记和ELISA反应,根据检测位点对应反应管显色值判定突变位点的基因型.以表皮生长因子受体(EGFR)基因外显子21和18上的3个SNP突变位点L858R、L861Q和G719C为检测对象,对62例肺癌血浆循环DNA样本进行检测,并与直接测序结果进行比较.结果 通过对3个突变位点的检测,2种方法均在L858R位点检出杂合子突变.直接测序法仅能够明确检出2例杂合子突变,另外1例样本因在突变位点出现不明显的套峰而无法明确判定突变类型.而新方法能够明确检出6例杂合子突变.结论 建立了一种基于连接酶-ELISA的简便、灵敏的SNP突变检测方法,适合于在简单实验条件下对不均一样本进行常规突变检测.

作者:崔海忠;肖娜;张永平;陈大贵;唐一通

来源:天津医药 2015 年 43卷 5期

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作者:
崔海忠;肖娜;张永平;陈大贵;唐一通
来源:
天津医药 2015 年 43卷 5期
标签:
多态性,单核苷酸 突变 基因型 DNA连接酶类 酶联免疫吸附测定 polymorphism single nucleotide mutation genotype DNA ligases enzyme-linked immunosorbent assay
目的 研究一种简便、灵敏的单核苷酸多态性(SNP)分型方法,使其能够在简单实验条件下进行常规的临床样本检测.方法 设计针对突变位点的检测探针,通过检测探针的连接、通用扩增、标记和ELISA反应,根据检测位点对应反应管显色值判定突变位点的基因型.以表皮生长因子受体(EGFR)基因外显子21和18上的3个SNP突变位点L858R、L861Q和G719C为检测对象,对62例肺癌血浆循环DNA样本进行检测,并与直接测序结果进行比较.结果 通过对3个突变位点的检测,2种方法均在L858R位点检出杂合子突变.直接测序法仅能够明确检出2例杂合子突变,另外1例样本因在突变位点出现不明显的套峰而无法明确判定突变类型.而新方法能够明确检出6例杂合子突变.结论 建立了一种基于连接酶-ELISA的简便、灵敏的SNP突变检测方法,适合于在简单实验条件下对不均一样本进行常规突变检测.