目的:探索apelin-13对干细胞定向血管网分化的调控作用。方法采用组织块贴壁法从人脐带华通胶组织中分离间充质干细胞,流式细胞仪检测其免疫表型。取第3代人华通胶间充质干细胞,分别接种于4个培养瓶中,记为A1、A2、A3、A4组,用诱导液诱导7 d,每天向4组中分别加入浓度0、1×10-6、10×10-6、100×10-6 mol/L的apelin-1320μL,倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况,并对其进行血管性血友病因子(vWF)抗体免疫荧光染色及CD31流式细胞学鉴定。使用水凝胶的三维培养基对诱导后的内皮细胞进行培养,并按照原A1、A2、A3、A4组的顺序重新依次编号为S1、S2、S3、S4组。每天分别向S1、S2、S3、S4组中加入浓度0、1×10-6、10×10-6、100×10-6 mol/L的apelin-1320μL。7 d后倒置显微镜下观察细胞的形态、生长情况及在三维培养基中形成血管样结构情况。结果人华通胶间充质干细胞可以诱导分化为vWF免疫荧光染色阳性的内皮样细胞。随着apelin-13蛋白浓度的增加,CD31阳性表达率也随之升高。显微镜下观察到内皮样细胞在水凝胶的三维培养基中能够形成血管样结构。结论证实apelin-13参与并调控人脐带华通胶间充质干细胞分化形成血管网。
作者:高彦琳;陈厚良;张宁坤;高连如;朱智明
来源:天津医药 2015 年 6期