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目的:探讨肿瘤坏死因子(TNF)-α对肿瘤相关钙信号转导蛋白(TROP)-2表达的影响及其对细胞侵袭和迁移能力的影响。方法以0、10、20、30、50、100、200μg/L的TNF-α处理人结肠癌HCT-116细胞,采用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞存活率。采用Western blot检测TROP-2的表达量。采用划痕实验和Transwell实验检测20μg/L TNF-α处理前后细胞侵袭和迁移能力。借助脂质体Lipofectamine?2000转染TROP-2 siRNA,实时荧光定量PCR和Western blot验证转染后TROP-2的mRNA和蛋白水平。划痕实验和Transwell实验再次检测TNF-α对转染TROP-2 siRNA细胞的侵袭和迁移能力的影响。结果0、10、20、30、50μg/L的TNF-α处理24 h和48 h时细胞存活率差异无统计学意义。100、200μg/L与0μg/L比较,细胞存活率下降(P<0.05)。与TNF-α浓度为0μg/L比较,10、20、30、50μg/L时TROP-2的表达量均升高,20μg/L时TROP-2的表达量最高(P<0.05);而TNF-α浓度为100、200μg/L时TROP-2的表达量下降(P<0.05)。划痕实验和Transwell实验中,TNF-α组24 h时的细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均较对照组增加(P<0.05)。转染TROP-2 siRNA后siRNA组中TROP-2的mRNA和蛋白水平均低于正常对照组和阴性对照组(P<0.05)。此外,siRNA组24 h时的

作者:赵鹏;陈俊卯;曹文斌;杨光华;虞向阳;刘春辉;郑阳

来源:天津医药 2015 年 12期

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作者:
赵鹏;陈俊卯;曹文斌;杨光华;虞向阳;刘春辉;郑阳
来源:
天津医药 2015 年 12期
标签:
结肠肿瘤 肿瘤坏死因子α 肿瘤侵润 细胞运动 肿瘤相关钙信号转导蛋白-2 colonic neoplasms tumor necrosis factor-alpha neoplasm invasiveness cell movement TROP-2
目的:探讨肿瘤坏死因子(TNF)-α对肿瘤相关钙信号转导蛋白(TROP)-2表达的影响及其对细胞侵袭和迁移能力的影响。方法以0、10、20、30、50、100、200μg/L的TNF-α处理人结肠癌HCT-116细胞,采用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞存活率。采用Western blot检测TROP-2的表达量。采用划痕实验和Transwell实验检测20μg/L TNF-α处理前后细胞侵袭和迁移能力。借助脂质体Lipofectamine?2000转染TROP-2 siRNA,实时荧光定量PCR和Western blot验证转染后TROP-2的mRNA和蛋白水平。划痕实验和Transwell实验再次检测TNF-α对转染TROP-2 siRNA细胞的侵袭和迁移能力的影响。结果0、10、20、30、50μg/L的TNF-α处理24 h和48 h时细胞存活率差异无统计学意义。100、200μg/L与0μg/L比较,细胞存活率下降(P<0.05)。与TNF-α浓度为0μg/L比较,10、20、30、50μg/L时TROP-2的表达量均升高,20μg/L时TROP-2的表达量最高(P<0.05);而TNF-α浓度为100、200μg/L时TROP-2的表达量下降(P<0.05)。划痕实验和Transwell实验中,TNF-α组24 h时的细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均较对照组增加(P<0.05)。转染TROP-2 siRNA后siRNA组中TROP-2的mRNA和蛋白水平均低于正常对照组和阴性对照组(P<0.05)。此外,siRNA组24 h时的