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目的 体外培养人牙周膜韧带细胞(HPDLCs)和人牙龈成纤维细胞(HGFs),对比两者成骨、成软骨以及成脂的多向分化潜能的差异.方法 运用酶消化结合组织块法体外培养HPDLCs和HGFs,选择生长状态良好的3~4代HPDLCs和HGFs,进行成骨、成软骨、成脂诱导,未分化诱导的细胞作为对照组.分别用茜素红染色、油红O染色以及阿利新蓝染色分别检测两种细胞的成骨、成软骨及成脂分化能力.半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HPDLCs和HGFs中相关标志基因骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原蛋白(Col 1)、runt相关转录因子2(RUNX2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)、X型胶原蛋白(Col 10)mRNA的表达.结果 成骨诱导两种细胞培养至28 d时,细胞周围均有红染钙结节形成,HPDLCs形成的钙结节明显多于HGFs;成软骨诱导两种细胞14 d时均可见胞质蓝染的细胞,HGFs较HPDLCs明显;成脂诱导两种细胞21 d时,可见红色脂肪滴形成,HPDLCs形成的脂肪颗粒明显少于HGFs.HGFs和HPDLCs分化培养7 d和14 d后,均有OCN、Col 1、RUNX2、PPARγ2和Col 10的表达,在14 d时的表达均高于 7 d;HPDLCs 中 OCN、Col 1、RUNX2 的表达高于 HGFs,PPARγ2、Col 10 的表达低于 HGFs(均 P<0.05).结论 HPDLCs的成骨能力较HGFs强,成软骨和成脂能力较HGFs弱.

作者:苏瑞;宋立婷;董允允;邓嘉胤;蒋少云

来源:天津医药 2016 年 44卷 2期

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作者:
苏瑞;宋立婷;董允允;邓嘉胤;蒋少云
来源:
天津医药 2016 年 44卷 2期
标签:
人牙周膜韧带细胞 人牙龈成纤维细胞 细胞分化 成骨分化 成脂分化 成软骨分化 human periodontal ligament cells human gingival fibroblasts cell differentiation osteogenic differentia-tion adipogenic differentiation chondrogenic differentiation
目的 体外培养人牙周膜韧带细胞(HPDLCs)和人牙龈成纤维细胞(HGFs),对比两者成骨、成软骨以及成脂的多向分化潜能的差异.方法 运用酶消化结合组织块法体外培养HPDLCs和HGFs,选择生长状态良好的3~4代HPDLCs和HGFs,进行成骨、成软骨、成脂诱导,未分化诱导的细胞作为对照组.分别用茜素红染色、油红O染色以及阿利新蓝染色分别检测两种细胞的成骨、成软骨及成脂分化能力.半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HPDLCs和HGFs中相关标志基因骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原蛋白(Col 1)、runt相关转录因子2(RUNX2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)、X型胶原蛋白(Col 10)mRNA的表达.结果 成骨诱导两种细胞培养至28 d时,细胞周围均有红染钙结节形成,HPDLCs形成的钙结节明显多于HGFs;成软骨诱导两种细胞14 d时均可见胞质蓝染的细胞,HGFs较HPDLCs明显;成脂诱导两种细胞21 d时,可见红色脂肪滴形成,HPDLCs形成的脂肪颗粒明显少于HGFs.HGFs和HPDLCs分化培养7 d和14 d后,均有OCN、Col 1、RUNX2、PPARγ2和Col 10的表达,在14 d时的表达均高于 7 d;HPDLCs 中 OCN、Col 1、RUNX2 的表达高于 HGFs,PPARγ2、Col 10 的表达低于 HGFs(均 P<0.05).结论 HPDLCs的成骨能力较HGFs强,成软骨和成脂能力较HGFs弱.