目的探讨siRNA下调转化生长因子β受体Ⅰ(TGFBRⅠ)基因表达后对ST2细胞向脂肪细胞分化的作用。方法设计并合成针对TGFBRⅠ的靶向siRNA作为实验组,以转染Control siRNA作为对照组。应用qRT-PCR检测并比较转染ST2细胞后各组TGFBRⅠmRNA的表达和脂肪细胞特异性转录因子CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)α、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ、脂肪细胞表征因子FABP4 mRNA的表达水平。诱导5 d后对2组细胞进行油红O染色,检测TGFBRⅠsiRNA对ST2细胞分化的影响。利用激光共聚焦显微镜观察脂肪细胞的染色情况并对细胞进行拍照。另外,用异丙醇萃取出油红O,测定油红O在波长520 nm处的光密度(OD)值,并进行组间比较。结果转染TGFBRⅠsiRNA后,ST2细胞TGFBRⅠ基因的表达水平明显下调,TGFBRⅠsiRNA能够促进脂肪细胞生成,增强C/EBPα、PPARγ及FABP4 mRNA表达;经成脂诱导5 d后,转染TGFBRⅠsiRNA的细胞产生的脂滴明显较Control siRNA组多,且OD值高于Control siRNA组。结论 TGFBRⅠsiRNA能有效促进脂肪细胞的分化,提示TGFBRⅠ可能是前体细胞向脂肪细胞分化的重要调控因子。
作者:杨永旭;陈棣;张欣;王宝利
来源:天津医药 2016 年 44卷 9期