[目的]探讨miR-29b在高糖诱导的MPC-5足细胞上皮-间质转化中的作用及黄连素的保护机制.[方法]将MPC-5小鼠足细胞分为正常组、高糖组和高糖+50μmol/L黄连素组,培养48 h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养液上清液中的重组人转化生长因子-β1(TGF-β1),实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法测定miR-29b表达,Western blot法检测上皮向间充质细胞转分化(EMT)相关蛋白[α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肌间线蛋白(desmin)、podocin]的表达.将足细胞分别转染miR-29b mimic或miR-29b inhibitor后,再给予高糖刺激和/或黄连素培养,ELISA法测定培养液上清液中的TGF-β1;Western blot法检测EMT相关蛋白的表达.采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-29b与TGF-β1是否能够直接结合.[结果]与正常组相比,高糖组miR-29b表达降低,TGF-β1浓度上升,EMT相关蛋白α-SMA、desmin表达上升,podocin表达下降.与高糖组相比,高糖+黄连素组的miR-29b表达增加,TGF-β1浓度,α-SMA、desmin表达下降,podocin表达上升(P<0.01).与高糖组相比,高糖+miR-29b mimic组的TGF-β1浓度下降,α-SMA、desmin表达下降,podocin表达上升(P<0.01).与高糖+黄连素组相比,高糖+黄连素+miR-29b inhibitor组TGF-β1浓度上升,α-SMA、desmin表达上升,podocin表达下

作者：郭小雷

来源：天津中医药 2021 年 38卷 1期