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背景:抑制消减杂交(SSH)是一种较成熟的分离差异表达基因的方法,但用该方法构建大肠癌特异性基因消减cDNA文库和筛选相关基因的研究较少.目的:构建人大肠癌和癌旁组织的消减cDNA文库.方法:应用SSH技术分离大肠癌和癌旁正常组织差异表达基因的cDNA片段,将其与pGEM-T Easy载体连接,构建消减cDNA文库.将连接产物转化大肠杆菌DH5α进行文库扩增.随机挑取200个白色克隆,以聚合酶链反应(PCR)进行鉴定.结果:进行PCR扩增的200个克隆中,176个克隆有插入片段,片段分布于200～700bp.结论:成功构建了人大肠癌组织和癌旁组织差异表达基因的消减cDNA文库,为高通量筛选、克隆大肠癌特异性基因奠定了基础.
作者：叶方鹏；肖冰；南清振；吴保平；崔生达；张万岱
来源：胃肠病学 2004 年 9卷 3期
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