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目的 探讨干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)预处理大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)及其抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱发的小胶质细胞(microglia,MG)活化作用的影响.方法 采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMMSCs,利用含100 ng/ml的IFN-γ完全培养液对BMMSCs进行预处理;利用LPS(10ug/ml)诱导大鼠小胶质细胞活化.小胶质细胞分离纯化后,以1×105/孔种植于6孔板中,按以下分组将小胶质细胞和BMMSCs以直接接触的方式进行共培养24h:B组(单纯BMMSCs组)、L+B组(LPS+BMMSCs组)、I+B组(IFN-γ预处理BMMSCs组)、L+I+B组(LPS+ IFN-γ预处理BMMSCs组)、M组(单纯MG组)、L+M组(LPS+ MG组)、B+L+M组(BMMSCs+ LPS+ MG组)、I+B+L+M组(IFN-γ预处理BMMSCs+ LPS+ MG组).采用ELISA技术检测培养液上清TNF-α、IL-1β水平,免疫荧光法检测小胶质细胞表面标记物CD68表达.结果 L+M组小胶质细胞CD68表达增高,分泌TNF-α 、IL-1β含量明显增多;B+L+M组以及I+B+L+M组的小胶质细胞CD68表达水平、TNF-α 、IL-1β分泌量低于L+M组,且B+L+M组与I+B+L+M组相比有统计学差异(P<0.05).结论 BMMSCs和IFN-γ预处理的BMMSCs均可以直接接触的方式抑制LPS诱发的小胶质细胞的活化且经IFN-γ预处理后的BMMSCs对小

作者:杜春彦;杨静;王晓晨;冯泽国;郭全义;戴鑫

来源:武警医学 2017 年 28卷 6期

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作者:
杜春彦;杨静;王晓晨;冯泽国;郭全义;戴鑫
来源:
武警医学 2017 年 28卷 6期
标签:
骨髓间充质干细胞 小胶质细胞 活化 预处理 干扰素γ bone marrow mesenchymal stem cells microglia activation pretreatment IFN-γ
目的 探讨干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)预处理大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)及其抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱发的小胶质细胞(microglia,MG)活化作用的影响.方法 采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMMSCs,利用含100 ng/ml的IFN-γ完全培养液对BMMSCs进行预处理;利用LPS(10ug/ml)诱导大鼠小胶质细胞活化.小胶质细胞分离纯化后,以1×105/孔种植于6孔板中,按以下分组将小胶质细胞和BMMSCs以直接接触的方式进行共培养24h:B组(单纯BMMSCs组)、L+B组(LPS+BMMSCs组)、I+B组(IFN-γ预处理BMMSCs组)、L+I+B组(LPS+ IFN-γ预处理BMMSCs组)、M组(单纯MG组)、L+M组(LPS+ MG组)、B+L+M组(BMMSCs+ LPS+ MG组)、I+B+L+M组(IFN-γ预处理BMMSCs+ LPS+ MG组).采用ELISA技术检测培养液上清TNF-α、IL-1β水平,免疫荧光法检测小胶质细胞表面标记物CD68表达.结果 L+M组小胶质细胞CD68表达增高,分泌TNF-α 、IL-1β含量明显增多;B+L+M组以及I+B+L+M组的小胶质细胞CD68表达水平、TNF-α 、IL-1β分泌量低于L+M组,且B+L+M组与I+B+L+M组相比有统计学差异(P<0.05).结论 BMMSCs和IFN-γ预处理的BMMSCs均可以直接接触的方式抑制LPS诱发的小胶质细胞的活化且经IFN-γ预处理后的BMMSCs对小