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根据漆酶铜结合保守区氨基酸序列设计简并引物,从新型漆酶合成菌株栓菌420(Trametes sp.420)基因组DNA扩增得到一新的漆酶同工酶基因(lacC)片段,应用长距离反向PCR技术获得其两端侧翼序列.克隆得到的lacC序列长3640bp,包括长2263bp的开放读码框及5'和3'-非编码区.lacC cDNA序列长1560bp,编码一519aa的多肽.推导的LacC蛋白序列内部存在有10个潜在的N-糖基化位点和4个铜原子结合区.将不含自身信号序列的lacC cDNA以pPIC9载体为媒介克隆到表达载体pPIC9K上,转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115细胞.重组菌在含有0.3mmol/L CuSO4和0.8
作者：李剑凤；洪宇植；肖亚中
来源：微生物学报 2007 年 47卷 1期
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