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[目的]研究工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28-dexYG产右旋糖酐蔗糖酶的纯化和酶学性质.[方法]工程菌经过IPTG诱导后生产含His-tag融合蛋白的右旋糖酐蔗糖酶,通过硫酸铵沉淀、Ni-NTA亲和层析纯化,得到纯度较高的酶蛋白,并对纯酶进行了酶学性质及动力学研究.[结果]经过SDS-PAGE测得该酶的分子量约为170 kDa,与理论推测值基本相同.以蔗糖为底物,酶促反应的最适温度为25~30℃,最适pH值为5.4,动力学常数Km值为10.43 mmol/L;酶活在pH 5.0~8.0较为稳定,在室温(25 ℃)保藏4天仍有59

作者:王雅洁;张洪斌;胡雪芹;朱春宝;胡又佳

来源:微生物学报 2008 年 48卷 9期

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作者:
王雅洁;张洪斌;胡雪芹;朱春宝;胡又佳
来源:
微生物学报 2008 年 48卷 9期
标签:
右旋糖酐蔗糖酶 重组大肠杆菌 纯化 性质
[目的]研究工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28-dexYG产右旋糖酐蔗糖酶的纯化和酶学性质.[方法]工程菌经过IPTG诱导后生产含His-tag融合蛋白的右旋糖酐蔗糖酶,通过硫酸铵沉淀、Ni-NTA亲和层析纯化,得到纯度较高的酶蛋白,并对纯酶进行了酶学性质及动力学研究.[结果]经过SDS-PAGE测得该酶的分子量约为170 kDa,与理论推测值基本相同.以蔗糖为底物,酶促反应的最适温度为25~30℃,最适pH值为5.4,动力学常数Km值为10.43 mmol/L;酶活在pH 5.0~8.0较为稳定,在室温(25 ℃)保藏4天仍有59