[目的]由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的植物青枯病是一种毁灭性土传病害.胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS)是青枯雷尔氏菌关键的致病因子之一.通过构建胞外多糖缺失突变株,研究胞外多糖在青枯病致病中的作用.[方法]从青枯雷尔氏菌FJAT-91的基因组中克隆出胞外多糖合成结构基因epsD同源臂,克隆至自杀性质粒pK18mobsacB,再将庆大霉素抗性基因(Gm)插入同源臂中间,获得重组质粒pK18-epsD.将重组质粒转化至青枯雷尔氏菌FJAT-91感受态细胞中,通过同源重组敲除epsD基因,获得EPS合成缺失的突变株FJAT-91ΔepsD.研究突变株与野生菌株在菌落形态、胞外多糖合成、运动能力、定殖能力的差异性.[结果]突变菌株FJAT-91ΔepsD与出发菌株FJAT-91相比:胞外多糖产量显著减少,生长较慢;泳动能力(swimming motility)和群集运动能力(swarming motility)显著降低;在番茄苗根部和茎部的定殖能力显著降低;弱化指数(AI)为0.905,鉴定为无致病力菌株.[结论]胞外多糖在青枯雷尔氏菌的致病中起着关键的作用,本课题研究成果为开发植物疫苗提供了优良的材料与研究基础.
作者：陈小强；陈德局；朱育菁；陈燕萍；张海峰；刘波
来源：微生物学报 2018 年 58卷 5期
