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[目的 ]伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染动物常引起内脏和体表淋巴结脓肿,以被感染部位炎性细胞因子大量增加为特征.研究Cp感染小鼠巨噬细胞对IL-1α成熟分泌的影响及机制.[方法]采用荧光定量PCR、ELISA和Western blotting等方法,首先检测Cp(ATCC19410、XH02)及其磷脂酶D基因(pld)缺失株(ATCC19410△pld、XH02△pld)感染巨噬细胞对IL-1 α表达及成熟分泌的影响,进而以Ca2+螯合剂(EDTA、EGTA+Mg2+和BAPTA-AM)、calpain 抑制剂(calpain inhibitor Ⅲ、calpain inhibitor Ⅳ和 EST)处理巨噬细胞,观察对 Cp 感染介导IL-1α成熟分泌的影响.[结果]Cp感染巨噬细胞后,IL-1α mRNA表达及分泌显著增加,与ATCC19410、XH02感染巨噬细胞相比,ATCC19410△pld、XH02△pld感染细胞IL-1α表达及分泌显著下降.Cp感染引起巨噬细胞内Ca2+浓度显著增加,calpain活性增强,而缺失pld的Cp感染巨噬细胞内 Ca2+浓度显著下降,calpain活性降低.EDTA、EGTA+Mg2+、BAPTA-AM、calpain inhibitorⅢ.calpain inhibitor Ⅳ处理Cp感染的巨噬细胞,巨噬细胞的IL-1α表达及分泌显著下降.[结论]Cp感染可激活巨噬细胞IL-1α表达和成熟分泌,磷脂酶D参与Cp感染巨噬细胞介导的IL-1α成熟分泌.Cp感染巨噬细胞介导IL-1α成熟

作者:王晓涵;田尚全;邹安龙;谭静梅;易文毅;王芝英;周作勇

来源:微生物学报 2022 年 62卷 10期

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王晓涵;田尚全;邹安龙;谭静梅;易文毅;王芝英;周作勇
来源:
微生物学报 2022 年 62卷 10期
标签:
伪结核棒状杆菌 巨噬细胞 IL-1α 磷脂酶D 钙蛋白酶
[目的 ]伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染动物常引起内脏和体表淋巴结脓肿,以被感染部位炎性细胞因子大量增加为特征.研究Cp感染小鼠巨噬细胞对IL-1α成熟分泌的影响及机制.[方法]采用荧光定量PCR、ELISA和Western blotting等方法,首先检测Cp(ATCC19410、XH02)及其磷脂酶D基因(pld)缺失株(ATCC19410△pld、XH02△pld)感染巨噬细胞对IL-1 α表达及成熟分泌的影响,进而以Ca2+螯合剂(EDTA、EGTA+Mg2+和BAPTA-AM)、calpain 抑制剂(calpain inhibitor Ⅲ、calpain inhibitor Ⅳ和 EST)处理巨噬细胞,观察对 Cp 感染介导IL-1α成熟分泌的影响.[结果]Cp感染巨噬细胞后,IL-1α mRNA表达及分泌显著增加,与ATCC19410、XH02感染巨噬细胞相比,ATCC19410△pld、XH02△pld感染细胞IL-1α表达及分泌显著下降.Cp感染引起巨噬细胞内Ca2+浓度显著增加,calpain活性增强,而缺失pld的Cp感染巨噬细胞内 Ca2+浓度显著下降,calpain活性降低.EDTA、EGTA+Mg2+、BAPTA-AM、calpain inhibitorⅢ.calpain inhibitor Ⅳ处理Cp感染的巨噬细胞,巨噬细胞的IL-1α表达及分泌显著下降.[结论]Cp感染可激活巨噬细胞IL-1α表达和成熟分泌,磷脂酶D参与Cp感染巨噬细胞介导的IL-1α成熟分泌.Cp感染巨噬细胞介导IL-1α成熟