[目的]本研究旨在对前期鉴定到的nce-miR-34537进行表达和序列验证,预测nce-miR-34537的靶基因并明确其分子特性,进而检测nce-miR-34537及其靶基因在东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)侵染意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)工蜂过程的表达谱,为进一步探究nce-miR-34537调控东方蜜蜂微孢子虫侵染的功能和作用机制提供基础.[方法]通过Stem-loop-RT-PCR和Sanger测序验证nce-miR-34537的表达和序列.通过生物信息学软件预测nce-miR-34537的靶基因PIP5KI(Ⅰ型磷脂酰肌醇4-磷酸-5-激酶基因)的理化性质等分子特性和保守基序,并构建基于氨基酸序列的系统进化树.采用RT-qPCR检测nce-miR-34537及其靶基因的表达谱.[结果]nce-miR-34537在东方蜜蜂微孢子虫孢子中真实存在和表达.nce-miR-34537共靶向PIP5KI等151个基因.PIP5KI蛋白的分子式为C882H1 364N226O251S7,分子量约为19.37 kDa,含160个氨基酸和17个磷酸化位点,但不含信号肽,可同时定位于细胞核、线粒体、细胞质和分泌囊泡.东方蜜蜂微孢子虫的1个PIP5KI(AAJ76_2700017870)含4个保守基序,另1个PIP5KI(EEQ82436.1)含5个保守基序.东方蜜蜂微孢子虫、蜜蜂微孢子虫(N.apis)和鮟鱇思普雷格孢虫(Spraguea lophii)的 PIP5KI在进化树中聚为一支,且东方蜜蜂微孢子虫的PI

作者：王紫馨；张文德；张佳欣；赵萧；范小雪；荆欣；高旭泽；陈大福；郭睿

来源：微生物学报 2023 年 63卷 2期