[目的]长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)可通过竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)等多种方式发挥重要的调控作用,但蜜蜂lncRNA的功能研究至今依然缺失,lncRNA在蜜蜂免疫应答中的作用尚不清楚.本研究旨在揭示中华蜜蜂(Apis cerana cerana,简称中蜂)幼虫响应蜜蜂球囊菌(Ascosphiaera apis)侵染的免疫应答中lncRNA的调控功能及作用机制.笔者团队前期通过深度测序和生物信息学分析发现,lncRNA13164与ace-miR-4968存在靶向关系且潜在参与在中蜂幼虫对蜜蜂球囊菌侵染的应答.[方法]利用实时荧光定量 PCR(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测蜜蜂球囊菌接种后中蜂幼虫肠道内lncRNA13164的表达谱.采用ILoc-LncRNA软件预测lncRNA13164的亚细胞定位.联用RNAhybrid、Miranda和TargetScan软件预测lncRNA13164靶向的miRNA及miRNA靶向的mRNA.通过PCR和RT-qPCR验证lncRNA13164和ace-miR-4968的真实表达及二者间的结合关系.通过饲喂dsRNA对蜜蜂球囊菌侵染的中蜂幼虫肠道内lncRNA13164进行RNAi,进而检测lncRNA13164的沉默效果及ace-miR-4968和3个免疫基因(stk、e3ul和orl)的相对表达量.[结果]相较于未接种组,lncRNA13164的表达量在蜜蜂球囊菌接种组4日龄幼
作者:付中民;顾小雨;胡颖;赵浩东;祝智威;张浩宇;吉挺;牛庆生;陈大福;郭睿
来源:微生物学报 2023 年 63卷 3期