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作为生物体必需的营养元素之一,磷在物质代谢、信号传导和能量储存中起着关键作用.[目的]研究丝状真菌Podospora anserina中调控磷酸盐代谢相关转录因子的作用,可进一步阐明真核微生物中磷元素吸收的调控机制.[方法]利用同源重组的方法定点敲除P.anserina中2个磷代谢相关转录因子PaPho1和PaPho2,遗传杂交构建双重突变体△PaPho1△PaPho2;通过表型分析、无机磷含量测定和酸性磷酸酶活性测定分析各突变菌株的变化;利用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析磷代谢相关基因的表达情况.[结果]在无机磷作为唯一磷来源的培养基上,△PaPho1△PaPho2无法生长;在添加有机磷的培养基中,△PaPho1△PaPho2和野生型菌株生长无显著性差异.在同时添加有机磷和无机磷的培养基中,△PaPho1△PaPho2的无机磷含量和酸性磷酸酶活性比野生型菌株的分别下降了 25.0%和61.9%,△PaPho1△PaPho2中无机磷酸盐转运蛋白基因的表达水平显著降低.[结论]在P.anserina中,PaPho1和PaPho2作为调控磷酸盐代谢信号通路转录因子,对无机磷的吸收起到关键作用,但并不参与有机磷的代谢调控.该研究可为阐释丝状真菌P.anserina对无机磷吸收的调控机制提供参考.

作者:陈绮艺;李晓;杜文珍;申令;刘刚;谢宁

来源:微生物学报 2023 年 63卷 3期

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陈绮艺;李晓;杜文珍;申令;刘刚;谢宁
来源:
微生物学报 2023 年 63卷 3期
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丝状真菌 Podospora anserina 转录因子 基因敲除 磷代谢 无机磷
作为生物体必需的营养元素之一,磷在物质代谢、信号传导和能量储存中起着关键作用.[目的]研究丝状真菌Podospora anserina中调控磷酸盐代谢相关转录因子的作用,可进一步阐明真核微生物中磷元素吸收的调控机制.[方法]利用同源重组的方法定点敲除P.anserina中2个磷代谢相关转录因子PaPho1和PaPho2,遗传杂交构建双重突变体△PaPho1△PaPho2;通过表型分析、无机磷含量测定和酸性磷酸酶活性测定分析各突变菌株的变化;利用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析磷代谢相关基因的表达情况.[结果]在无机磷作为唯一磷来源的培养基上,△PaPho1△PaPho2无法生长;在添加有机磷的培养基中,△PaPho1△PaPho2和野生型菌株生长无显著性差异.在同时添加有机磷和无机磷的培养基中,△PaPho1△PaPho2的无机磷含量和酸性磷酸酶活性比野生型菌株的分别下降了 25.0%和61.9%,△PaPho1△PaPho2中无机磷酸盐转运蛋白基因的表达水平显著降低.[结论]在P.anserina中,PaPho1和PaPho2作为调控磷酸盐代谢信号通路转录因子,对无机磷的吸收起到关键作用,但并不参与有机磷的代谢调控.该研究可为阐释丝状真菌P.anserina对无机磷吸收的调控机制提供参考.