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目的 建立猪霍乱沙门菌和丙型副伤寒沙门菌的实时荧光PCR快速检测方法,应用于食品和食物中毒病人标本的猪霍乱沙门菌检测以及沙门菌属C群的鉴别诊断.方法 根据GenBank公布的猪霍乱沙门菌和丙型副伤寒沙门菌的保守序列(CP000857.1),设计引物和改良分子信标探针,优化PCR程序和PCR成分,以11种细菌为对照,建立实时荧光PCR检测方法,并用71株常见血清型的沙门菌评价该方法的灵敏度和特异性,所建立的方法应用于70份食品样品的检测.结果 该改良分子信标一荧光PCR方法的DNA最低检出限为10fg/反应体系,菌液最低检出限为20 CFU/反应体系;无交叉荧光信号产生.针对目标菌均出现特异荧光信号.对71株沙门菌属的检测,该方法的灵敏度和特异度为100

作者:林一曼;石晓路;朱玉梅;邱亚群;李迎慧;吕东月;扈庆华

来源:卫生研究 2011 年 40卷 4期

知识库介绍

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林一曼;石晓路;朱玉梅;邱亚群;李迎慧;吕东月;扈庆华
来源:
卫生研究 2011 年 40卷 4期
标签:
改良分子信标 实时荧光PCR 猪霍乱沙门菌 丙型副伤寒沙门菌
目的 建立猪霍乱沙门菌和丙型副伤寒沙门菌的实时荧光PCR快速检测方法,应用于食品和食物中毒病人标本的猪霍乱沙门菌检测以及沙门菌属C群的鉴别诊断.方法 根据GenBank公布的猪霍乱沙门菌和丙型副伤寒沙门菌的保守序列(CP000857.1),设计引物和改良分子信标探针,优化PCR程序和PCR成分,以11种细菌为对照,建立实时荧光PCR检测方法,并用71株常见血清型的沙门菌评价该方法的灵敏度和特异性,所建立的方法应用于70份食品样品的检测.结果 该改良分子信标一荧光PCR方法的DNA最低检出限为10fg/反应体系,菌液最低检出限为20 CFU/反应体系;无交叉荧光信号产生.针对目标菌均出现特异荧光信号.对71株沙门菌属的检测,该方法的灵敏度和特异度为100