目的：通过对经初步筛选证明具有生物活性的查尔酮类似物A59可能涉及的信号通道进行检测，进一步明确其抗肿瘤活性及作用机制。方法：对于以查尔酮为先导物设计合成类似物，以MTT法检测其对于人结肠癌细胞（HCT-116）的杀伤作用，筛选出具有较好生物活性的化合物A59。通过FCM法检测A59诱导HCT-116细胞凋亡和抑制细胞周期的情况。Western blot法检测HCT-116细胞中A59对ATF4及CHOP表达的影响。利用siRNA技术敲除CHOP后，用免疫荧光和FCM法检测在A59对于细胞凋亡的影响。结果：通过对自行设计合成查尔酮类似物进行筛选，发现A59对于HCT-116具有较强的增殖抑制作用（IC50=7.6μmol/L）。通过FCM法检测发现A59是通过诱导HCT-116细胞发生凋亡并抑制细胞周期发挥其生物活性。通过Western blot法检测发现A59剂量依赖性激活内质网应激信号通路中的关键蛋白CHOP，并通过siRNA基因沉默技术进一步确证A59是通过刺激CHOP的过表达发挥促进细胞凋亡的作用。结论：查尔酮类似物A59通过激活内质网应激信号通道中的关键蛋白CHOP来发挥对CHT116的增殖抑制作用。
作者：孙余省；朱冠保；金劲激；陶礼钧；朱维星；方军
来源：温州医科大学学报 2015 年 6期
