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为了检测弱精子症精子mtATPase6基因突变,采用PCR方法扩增了17例弱精子症mtDNA 8 602～9 416区域815 bp目的片段,用MspⅠ和HaeⅢ限制性内切酶酶切,分别用琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳和单链构像多态性(SSCP)筛查突变.筛选出3例突变标本,经测序确认突变位点和突变性质.结果显示17例标本全部扩增出mtDNA 8 602～9 416的815 bp目的片段,PCR产物经MspⅠ限制性内切酶酶切后电泳结果与剑桥序列预期酶切图谱相一致.PCR产物经HaeⅢ酶切,聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上出现泳动带的异常,在17例弱精子症中共筛选出2例酶切片段异常标本.PCR-HaeⅢ酶切产物的SSCP电泳图谱分析结果显示,在PCR-RFLP(HaeⅢ)电泳图谱正常的15例弱精子症标本中筛选出1例异常.两种方法在弱精子症精子标本中筛选出mtATPase6基因突变3例(3/17,17.7
作者：金龙金；张春玲；楼哲丰；张李雅；陈林丽；李玮；吕建新
来源：细胞生物学杂志 2007 年 29卷 4期
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