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目的 探讨寡聚化结构域样蛋白受体3(NLRP3)在2型糖尿病(T2DM)中表达及其对胰岛素抵抗(IR)模型脂肪细胞炎症反应和自噬的影响.方法 ELISA检测T2DM患者及正常对照组(Normal组)血清中NLRP3表达水平;体外诱导前脂肪细胞3T3-L1分化为成熟脂肪细胞,油红O染色进行鉴定;使用地塞米松诱导并建立3T3-L1脂肪细胞的IR模型,葡萄糖氧化酶法进行鉴定;采用siRNA技术转染3T3-L1脂肪细胞,并将细胞分为四组:si-NC组(转染si-NC的3T3-L1细胞)、si-NLRP3组(转染si-NLRP3的3T3-L1细胞)、IR-si-NC组(在IR模型中转染si-NC的3T3-L1细胞)、IR-si-NLRP3组(在IR模型中转染si-NLRP3的3T3-L1细胞).分别使用RT-PCR、ELISA、葡萄糖氧化酶法及Western blot实验检测上述各组细胞中NLRP3 mRNA表达,促炎因子白介素1β(IL-1β)、白介素18(IL-18)和自噬相关蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin1、p62的表达.结果 NLRP3在T2DM患者血清中的表达水平较Normal组显著增加(P<0.01);RT-PCR实验显示与si-NC组相比,si-NLRP3与IR-si-NLRP3组的3T3-L1细胞中NLRP3 mRNA的表达均显著降低(P<0.05),而IR-si-NC组细胞中NLRP3 mRNA的表达明显升高(P<0.05);ELISA实验结果表明IR模型中脂肪细胞对促炎因子IL-1β、IL-18的表达显著增加,而下调IR模型脂肪细胞NLRP3表达可明显抑

作者:沙依拉·海米提;阿地拉·阿里木;阿不拉江·玉孙;王新玲;张穗乡

来源:西部医学 2021 年 33卷 10期

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作者:
沙依拉·海米提;阿地拉·阿里木;阿不拉江·玉孙;王新玲;张穗乡
来源:
西部医学 2021 年 33卷 10期
标签:
2型糖尿病;脂肪细胞;寡聚化结构域样蛋白受体3;白介素1β;白介素18;自噬
目的 探讨寡聚化结构域样蛋白受体3(NLRP3)在2型糖尿病(T2DM)中表达及其对胰岛素抵抗(IR)模型脂肪细胞炎症反应和自噬的影响.方法 ELISA检测T2DM患者及正常对照组(Normal组)血清中NLRP3表达水平;体外诱导前脂肪细胞3T3-L1分化为成熟脂肪细胞,油红O染色进行鉴定;使用地塞米松诱导并建立3T3-L1脂肪细胞的IR模型,葡萄糖氧化酶法进行鉴定;采用siRNA技术转染3T3-L1脂肪细胞,并将细胞分为四组:si-NC组(转染si-NC的3T3-L1细胞)、si-NLRP3组(转染si-NLRP3的3T3-L1细胞)、IR-si-NC组(在IR模型中转染si-NC的3T3-L1细胞)、IR-si-NLRP3组(在IR模型中转染si-NLRP3的3T3-L1细胞).分别使用RT-PCR、ELISA、葡萄糖氧化酶法及Western blot实验检测上述各组细胞中NLRP3 mRNA表达,促炎因子白介素1β(IL-1β)、白介素18(IL-18)和自噬相关蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin1、p62的表达.结果 NLRP3在T2DM患者血清中的表达水平较Normal组显著增加(P<0.01);RT-PCR实验显示与si-NC组相比,si-NLRP3与IR-si-NLRP3组的3T3-L1细胞中NLRP3 mRNA的表达均显著降低(P<0.05),而IR-si-NC组细胞中NLRP3 mRNA的表达明显升高(P<0.05);ELISA实验结果表明IR模型中脂肪细胞对促炎因子IL-1β、IL-18的表达显著增加,而下调IR模型脂肪细胞NLRP3表达可明显抑