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目的应用基于聚合酶链式反应( PCR)技术的改良消减杂交方法克隆肿瘤凋亡相关基因,验证维甲酸调控生物细胞增殖、分化 ,诱导多种肿瘤细胞凋亡的作用.方法以全反式维甲酸( all- trans retinoic acid)诱导前列腺癌 DU- 145细胞、早幼粒白血病 HL- 60细胞和乳腺腺癌 MCF- 7细胞产生凋亡,在此基础上,采用基于 PCR技术的改良消减杂交方法克隆肿瘤细胞凋亡相关基因.结果在维甲酸诱导前列腺癌 DU- 145细胞、早幼粒白血病 HL- 60细胞和乳腺腺癌 MCF- 7细胞产生凋亡过程中,有 TNF、泛素、热休克蛋白和 C- erb B- 2基因参与,并成功克隆出多条可能与凋亡密切相关的未知基因,均被 GenBank收录,登录号为 AF174394,AF144056,AF141882.结论这种基于 PCR技术的改良消减杂交方法对于差异表达基因的克隆是十分有效的.
作者：邵晨；汪涌；朱峰；张磊；晏伟
来源：中国临床康复 2003 年 7卷 17期
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