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目的:观察低氧培养条件下小鼠胎肝间质细胞中低氧诱导因子1α(hypoxiainduciblefactor 1,HIF-1α)的表达情况,了解造血间质细胞在低氧环境中的生物学特性.方法:取孕14.5 d小鼠胚胎肝细胞进行贴壁培养及传代.生长至次融合状态的第5代细胞在950mL/L N2和50mL/LCO2混合气条件下培养,持续通以缺氧混合气0(对照组),2,4,8,16,32 h,在37℃培养.在合适时间下应用半定量RT-PCR和Western blot技术检测其HIF-1α基因表达.结果:在常氧压下培养的胎肝间质细胞中,HIF-1αmRNA及其蛋白水平均较低;而低氧培养则可显著提高胎肝间质细胞HIF-1α基因的mRNA及其蛋白水平.HIF-1αmRNA在低氧培养2 h时即显著增高,8 h时达到高峰水平,PCR产物HIF-1与β-actin信号比从对照组(3.85±1.98)

作者:刘革修;张洹;何冬梅

来源:中国临床康复 2005 年 9卷 7期

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作者:
刘革修;张洹;何冬梅
来源:
中国临床康复 2005 年 9卷 7期
标签:
低氧/病理生理学 小鼠 基因表达 间质细胞
目的:观察低氧培养条件下小鼠胎肝间质细胞中低氧诱导因子1α(hypoxiainduciblefactor 1,HIF-1α)的表达情况,了解造血间质细胞在低氧环境中的生物学特性.方法:取孕14.5 d小鼠胚胎肝细胞进行贴壁培养及传代.生长至次融合状态的第5代细胞在950mL/L N2和50mL/LCO2混合气条件下培养,持续通以缺氧混合气0(对照组),2,4,8,16,32 h,在37℃培养.在合适时间下应用半定量RT-PCR和Western blot技术检测其HIF-1α基因表达.结果:在常氧压下培养的胎肝间质细胞中,HIF-1αmRNA及其蛋白水平均较低;而低氧培养则可显著提高胎肝间质细胞HIF-1α基因的mRNA及其蛋白水平.HIF-1αmRNA在低氧培养2 h时即显著增高,8 h时达到高峰水平,PCR产物HIF-1与β-actin信号比从对照组(3.85±1.98)