目的:观察能诱导体外培养的破骨细胞凋亡的骨康含药血清对新生大鼠成骨细胞凋亡的抑制作用.方法:实验于2003-01/2003-06在广州中医药大学第一附属manbet官网登录
骨科实验室完成.①选用1 d龄雌性SD大鼠3只,用于分离原代成骨细胞;6月龄SD雌性大鼠24只用于制备含药血清.②6月龄SD雌性大鼠随机分成3组,每组8只,分别为骨康方组、罗盖全组和空白对照组(蒸馏水灌胃).骨康方由淫羊藿、补骨脂、黄芪、熟地、白芍等药物组成,为中药煎剂,含生药量1.43 kg/L,按4.8 g/kg生药灌胃,相当于临床剂量的10倍.罗盖全(活性维生素D3)按0.084μg/kg灌胃,相当于临床剂量的10倍.各组大鼠分别用上述物质灌胃,每次17.5 mL/kg,2次/d,间隔5h,连续灌胃3 d,最后1次灌胃后2 h腹主动脉取血,离心获取含药血清.将传代的成骨细胞分别加入含药血清培养7 d时,加入肿瘤坏死因子α,剂量为30μg/kg,分别于12和24 h后取出长有成骨细胞的盖玻片,经吖啶橙染色,置Nikon荧光显微镜下直接观察拍照.③成骨细胞的鉴定,包括形态学观察和碱性磷酸酶染色和矿化结节茜素红染色观察.结果:①在用空白血清培养7 d的成骨细胞中加入肿瘤坏死因子α,12 h时可见到成骨细胞出现凋亡征象,24 h时出现典型的细胞凋亡形态.②在用骨康血清和罗盖全血清培养7 d的成骨细胞可部分对抗肿瘤
作者：韩清民；施佳平；林一峰；方坚；庄洪；刘庆思
来源：中国临床康复 2005 年 9卷 23期
