背景:葛根素在体外有抗缺血再灌注损伤的作用,改善微循环,抑制血小板聚集的作用,但葛根素保护脑缺血神经元损伤是否与细胞凋亡有关尚不清楚.目的:在细胞水平观察葛根素在体外模拟脑缺血再灌注诱导的神经元损伤中的保护作用.设计:随机对照的实验.单位:华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系.对象:实验于2002-03/11在华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系实验室完成.以培养的鼠成神经瘤细胞株N2a细胞为观察对象.方法:将培养的N2a细胞放人通有体积分数为0.05的C02和体积分数为0.95的N2的37℃培养箱中培养90 min后,加入葛根素(0.5 mmol/L)后正常培养24 h.采用MTT法观察细胞的生存能力,采用Annexin-V染色法检测早期细胞凋亡程度,收集培养上清分析乳酸脱氢酶酶活性反应细胞膜通透性.免疫印迹分析半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达;同时检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的活性.主要观察指标:各组细胞早期细胞凋亡程度,乳酸脱氢酶酶活性,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达和活性.结果:葛根素能显著提高N2a细胞模拟缺血再灌注24 h后的存活率;显著降低培养液中乳酸脱氢酶活性;显著降低缺血再灌注的N2a细胞的凋亡程度(P＜0.01);与此同时,葛根素可显著降低缺血再灌注诱导的半胱氨酸天冬氨
作者：陈娟；周洁；冯友梅
来源：中国临床康复 2005 年 9卷 33期
