目的:观察大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛素阳性细胞能力.方法:①实验于2004-09/2005-01在南京医科大学第一附属manbet官网登录
内分泌及代谢病研究室完成.选用清洁级雄性SD大鼠10只.②取大鼠骨髓,体外分离、培养骨髓间充质干细胞,流式细胞术检测CD45/CD90表达及细胞周期,明确骨髓间充质干细胞特性.③取第3代细胞,随机分为2组,低糖诱导组[先予体积分数0.1胎牛血清低糖Dulbecco改良的Eagle培养液(5.6 mmol/L葡萄糖)]或高糖诱导组[高糖Dulbecco改良的Eagle培养液(25 mmol/L葡萄糖)]培养14 d,换予体积分数0.05胎牛血清低糖Dulbecco改良的Eagle培养液或高糖Dulbecco改良的Eagle培养液+尼克酰胺(10 mmol/L)培养7 d,再加Exendin-4(10 nmol/L)诱导培养7 d.④采用反转录聚合酶链反应法检测胰腺-十二指肠同源盒基因1、胰岛素原和胰岛素基因的表达,激光共聚焦显微镜观察胰岛素蛋白的表达,流式细胞术检测胰岛素阳性细胞数和平均荧光强度,电镜观察诱导后细胞的超微结构.⑤组间计量资料比较采用方差分析.结果:①骨髓间充质干细胞贴壁生长,呈长梭形.流式细胞术检测显示,CD90阳性率为(96.3±1.3)
作者：武晓泓；刘翠萍；茅晓东；徐宽枫；崔岱；朱剑；刘超
来源：中国临床康复 2005 年 9卷 34期
