目的:探讨凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用,探讨其在抗癌方面的作用.方法:①实验于2002-08/2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成.将对数生长期NCI-H446细胞分为6组:空白对照组,脂质体10mg/L组(仅加空脂质体),NSODN 500nmol/L组(该3组均为对照组),survivin反义寡核苷酸500 nmoL/L组,bcl-2反义寡核苷酸5 μmol/L,survivin反义寡核苷酸500nmol/L+bcl-2反义寡核苷酸5 μmol/L组(分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸,48h后收取细胞进行以下检测).②在脂质体介导下,以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC-A1,于72 h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达.凋亡指数=(静止期/DNA合成前期)占整个细胞周期的百分比;增殖指数=(DNA复制期+合成后期/有丝分裂期)占整个细胞周期的百分比.②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI-H446后,用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数,锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率.③计量资料差异性比较采用方差分析和q检验.结果:①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因.survivin反义寡核苷酸作用细胞株后,出现生长抑制和细胞凋亡,细胞survivin mRNA明显下调,反义寡核苷酸500nmo
作者:夏雪梅;陈余清;蔡映云;李殿明;胡俊锋;黄礼年
来源:中国临床康复 2005 年 9卷 47期