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目的:探讨新西兰兔骨髓间充质干细胞在体外不同条件下定向分化为阴茎海绵体平滑肌细胞的可行性.方法:实验于2004-10/2005-05在中山大学第二附属manbet官网登录 实验中心完成.采用全骨髓贴壁法分离骨髓间充质干细胞;分别通过添加血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子进行体外直接诱导以及与阴茎海绵体平滑肌细胞不同比例(根据骨髓间充质干细胞与阴茎海绵体平滑肌细胞数量比,共培养诱导分为4:1组、2:1组以及1:1组.每6孔作为1个诱导组,每孔兔骨髓间充质干细胞终浓度为1×108 L-1,阴茎海绵体平滑肌细胞相应终浓度分别为0.25×108 L-1、0.5×108 L-1及1×108 L-1)进行共培养两种方法诱导干细胞分化为阴茎海绵体平滑肌细胞.培养2 d后的细胞爬片进行荧光免疫细胞化学染色测定抗α平滑肌肌动蛋白抗体表达,全程避光进行.完成染色后,立即进行激光共聚焦显微镜镜检.每孔爬片随机取5个视野,计算出每孔中Hoechst33342与FITC(或Cy3)双阳性细胞数及Hoechst33342单阳性的细胞数的比值以计算每孔的诱导率,应用SPSS软件进行完全随机设计的方差分析.结果:①阴茎海绵体平滑肌细胞的生长特性、形态及鉴定:组织块贴壁后细胞渐游出,呈梭形或长条形,原代细胞汇合90

作者:张金明;何涛;黄红军

来源:中国临床康复 2006 年 10卷 1期

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张金明;何涛;黄红军
来源:
中国临床康复 2006 年 10卷 1期
标签:
干细胞 骨髓细胞 生物医学工程 细胞分化 肌,平滑/细胞学 细胞,培养的
目的:探讨新西兰兔骨髓间充质干细胞在体外不同条件下定向分化为阴茎海绵体平滑肌细胞的可行性.方法:实验于2004-10/2005-05在中山大学第二附属manbet官网登录 实验中心完成.采用全骨髓贴壁法分离骨髓间充质干细胞;分别通过添加血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子进行体外直接诱导以及与阴茎海绵体平滑肌细胞不同比例(根据骨髓间充质干细胞与阴茎海绵体平滑肌细胞数量比,共培养诱导分为4:1组、2:1组以及1:1组.每6孔作为1个诱导组,每孔兔骨髓间充质干细胞终浓度为1×108 L-1,阴茎海绵体平滑肌细胞相应终浓度分别为0.25×108 L-1、0.5×108 L-1及1×108 L-1)进行共培养两种方法诱导干细胞分化为阴茎海绵体平滑肌细胞.培养2 d后的细胞爬片进行荧光免疫细胞化学染色测定抗α平滑肌肌动蛋白抗体表达,全程避光进行.完成染色后,立即进行激光共聚焦显微镜镜检.每孔爬片随机取5个视野,计算出每孔中Hoechst33342与FITC(或Cy3)双阳性细胞数及Hoechst33342单阳性的细胞数的比值以计算每孔的诱导率,应用SPSS软件进行完全随机设计的方差分析.结果:①阴茎海绵体平滑肌细胞的生长特性、形态及鉴定:组织块贴壁后细胞渐游出,呈梭形或长条形,原代细胞汇合90