目的:观察人瘢痕疙瘩成纤维细胞中的P53蛋白对血管内皮细胞生长因子表达的影响作用.方法:实验于2005-05/11在哈尔滨医科大学第二临床医学院实验室完成.成纤维细胞来源哈尔滨医科大学附属第二manbet官网登录
整形美容激光中心收治的烧伤患者的瘢痕疙瘩组织(临床病理证实).将瘢痕疙瘩切成1 mm×1 mm组织块,用含体积分数为0.2的胎牛血清的1640培养液,置于37℃,体积分数为0.05的CO2条件下培养,取3～6代细胞.采用腺病毒介导法将野生型p53基因转染至人瘢痕疙瘩成纤维细胞中,非转染细胞为对照组.应用间接免疫荧光法和western blott法检测P53蛋白;应用酶联免疫吸附法检测血管内皮细胞生长因子表达.结果:①间接免疫荧光法检测P53蛋白:P53蛋白表达在细胞核内,转染组和非转染组细胞中均有P53蛋白表达,转染组细胞内P53蛋白表达明显高于非转染组细胞.②Western blot法检测P53蛋白:转染组和非转染组细胞中均有P53蛋白表达,但非转染组细胞内P53蛋白表达量很少;转染组细胞在转染48 h后,细胞中P53蛋白表达量高;明显高于非转染组细胞.③酶联免疫吸附法测定血管内皮细胞生长因子:转染组和非转染组细胞中均检测出血管内皮细胞生长因子表达,但转染组细胞血管内皮细胞生长因子表达显著低于非转染组细胞(P＜0.01).结论:P53蛋白能够明显抑制
作者：肖志波；郝立君；任立宏；滕雯
来源：中国临床康复 2006 年 10卷 13期
