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目的:观察热休克预处理诱导的热休克蛋白27对晶状体上皮细胞的保护作用.方法:实验于2004-01/12在中国医科大学卫生部小儿先天畸形重点实验室完成.体外培养人晶状体上皮细胞系HLB-C3细胞,随机分为4组:①正常对照组.②氧化损伤组:细胞中加入200 μmol/L H2O2作用6 h.③热休克处理组:42℃预热30 min后,37℃恢复2 h,处理同氧化损伤组.④放线菌酮组:预热前30 min加入放线菌酮(25 mg/L),其余处理同热休克处理组.观察各组细胞存活率、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性;DNA ladder和Annexin V-FITC流式细胞仪检测晶状体上皮细胞凋亡率;免疫印迹法检测各组中热休克蛋白27和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达.结果:①细胞活力:氧化损伤组低于正常对照组(0.24±0.02,0.28±0.04,P<0.01),热休克处理组高于氧化损伤组(0.27±0.04,P<0.05),放线菌酮组低于热休克处理组(0.23±0.01,P<0.01).②细胞凋亡率:氧化损伤组高于正常对照组[(15.69±1.54)

作者:张雪岩;张涤;张杨;贾琳琳

来源:中国临床康复 2006 年 10卷 32期

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作者:
张雪岩;张涤;张杨;贾琳琳
来源:
中国临床康复 2006 年 10卷 32期
标签:
热休克蛋白质类 细胞凋亡 过氧化氢 晶体/细胞学
目的:观察热休克预处理诱导的热休克蛋白27对晶状体上皮细胞的保护作用.方法:实验于2004-01/12在中国医科大学卫生部小儿先天畸形重点实验室完成.体外培养人晶状体上皮细胞系HLB-C3细胞,随机分为4组:①正常对照组.②氧化损伤组:细胞中加入200 μmol/L H2O2作用6 h.③热休克处理组:42℃预热30 min后,37℃恢复2 h,处理同氧化损伤组.④放线菌酮组:预热前30 min加入放线菌酮(25 mg/L),其余处理同热休克处理组.观察各组细胞存活率、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性;DNA ladder和Annexin V-FITC流式细胞仪检测晶状体上皮细胞凋亡率;免疫印迹法检测各组中热休克蛋白27和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达.结果:①细胞活力:氧化损伤组低于正常对照组(0.24±0.02,0.28±0.04,P<0.01),热休克处理组高于氧化损伤组(0.27±0.04,P<0.05),放线菌酮组低于热休克处理组(0.23±0.01,P<0.01).②细胞凋亡率:氧化损伤组高于正常对照组[(15.69±1.54)