背景:自体软骨细胞来源困难是束缚软骨细胞移植和软骨工程学发展的主要问题之一.骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,在不同诱导条件下,骨髓间充质干细胞能分化形成多种组织细胞,如软骨细胞、成骨细胞、成肌细胞及神经细胞等.胰岛素样生长因子-Ⅰ是一种对肢体和软骨的形成及发育起重要调控作用的生长因子.目的:观察胰岛素样生长因子-Ⅰ和软骨细胞培养液是否能在体外诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化.设计:开放性实验.单位:中山大学附属第二manbet官网登录
骨科和医学研究中心.材料:实验于2003-03/11在中山大学附属第二manbet官网登录
医学研究中心完成.人骨髓间充质干细胞取自因健康原因需终止妊娠的4~6月龄水囊引产的胚胎.方法:采用Percoll分离液分离培养人胚骨髓间充质干细胞,体外扩增,用流式细胞仪测定骨髓间充质干细胞的CD44,CD71,CD34,CD45表达;在第4代骨髓间充质干细胞的培养基中加入100μg/L胰岛素样生长因子-Ⅰ和软骨细胞培养液,采用倒置显微镜观察、Ⅱ型胶原免疫组织化学、细胞内蛋白多糖含量测定等方法判断诱导细胞的形态变化和表达软骨基质的能力.主要观察指标:通过检测细胞CD34,CD44,CD45的表达,进行骨髓间充质干细胞表型鉴定.通过观测诱导后细胞Ⅱ型胶原免疫组织化学及细胞分泌蛋白多糖能力的变化判断其是否向
作者:黄建荣;李建华;李卫平;沈慧勇;刘尚礼;王志勇;许继德;宋卫东
来源:中国临床康复 2006 年 10卷 33期