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目的:改良成骨细胞分离培养方法,为骨形成、骨代谢以及骨组织工程等基础研究提供种子细胞.方法:实验于2002-09/2005-09在陕西省干细胞工程技术研究中心完成.①无菌条件下取五六个月龄流产胎儿颅盖骨(家属知情同意),去除骨膜及周围结缔组织,然后用2.5g/L胰蛋白酶消化20 min,终止消化后,去除骨缝组织,剪碎,将碎骨块接种于培养瓶中分离培养成骨细胞.②细胞纯化采用差速贴壁法.通过相差显微镜观察人胚成骨细胞原代和传代培养的生长特征.③用碱性磷酸酶染色、钙结节茜素红染色等方法对所获得的成骨细胞进行鉴定.结果:①人胚成骨细胞原代和传代培养的生长特征:原代培养至第5天,骨块边缘出现零散的细胞,这些细胞的形态主要为梭形、三角形或多边形.原代培养第14天后,形成融合层,细胞呈圆形、卵圆形或方形紧密排列,叠层生长.传代细胞主要呈三角形或方形细胞,细胞排列无方向性,出现集落样生长趋势.②人胚成骨细胞的鉴定结果:90
作者：马勇江；窦忠英；李玉谷；张媛
来源：中国临床康复 2006 年 10卷 37期
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