背景:颞叶癫痫的发病与海马神经元丢失死亡有关,但其海马神经元丢失的具体方式和详尽机制还不清楚,难以确定海马神经元癫痫样放电与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteine-containing ASPartate-specific protease,Caspase-3)激活及神经元凋亡的必然联系.目的:观察体外培养大鼠海马神经元癫痫模型中神经元凋亡及Caspase-3基因的表达情况.设计:开放性实验.单位:解放军第二军医大学长海manbet官网登录
神经外科,解放军第二军医大学长征manbet官网登录
神经外科.材料:实验于2002-06/2003-06在解放军第二军医大学神经外科实验室完成.选取出生24 h内的SD大鼠10只,雌雄不拘.Caspase-3流式检测试剂盒购自美国BD公司,PCR引物由上海皓嘉公司合成.方法:①将24 h内新生SD大鼠断头取脑,解剖出双侧海马,制备海马神经元癫痫样放电细胞模型.通过全细胞膜片钳对细胞模型放电情况进行检测.以培养8 d并经无镁处理的神经元细胞作为癫痫样放电模型组,以培养8 d但未经无镁处理的神经元细胞作为空白对照组,记录电位变化.②采用反转录-聚合酶链法克隆大鼠全长caspase-3 cDNA,并加以标记;采用原位杂交和流式细胞术检测caspase-3基因表达和神经元凋亡情况.主要观察指标:①Caspase-3基因cDNA的克隆结果.②Caspase-3原位杂交检测结果.③细胞凋亡检测结果.结果:
作者：刘建民；赵文元；赵瑞；卢以成；周晓平
来源：中国临床康复 2006 年 10卷 42期
