目的:观察同型半胱氨酸诱导培养人脐静脉内皮细胞表达RANTESmRNA及蛋白,并分析其机制.方法:实验于2004-11/2005-11在新乡医学院分子生物研究室完成.①采用酶消化法分离脐静脉内皮细胞.②当脐静脉内皮细胞生长至汇合状态时,随机分为对照组、同型半胱氨酸组和二硫代氨基甲酸吡咯烷预处理组.对照组用无血清培养基、同型半胱氨酸组用含0.1 mmol/L同型半胱氨酸的无血清培养基培养,分别孵育8 h;二硫代氨基甲酸吡咯烷预处理组用含100 μmol/L二硫代氨基甲酸吡咯烷的无血清培养基培养20 min后,再加入0.1 mmol/L的同型半胱氨酸孵育8 h.③采用斑点杂交检测脐静脉内皮细胞中RANTES mRNA的表达.④采用Western blot检测脐静脉内皮细胞中RANTES蛋白的表达.⑤用免疫细胞化学方法检测正常对照组和同型半胱氨酸组核因子κB P65蛋白的表达.结果:①脐静脉内皮细胞中RANTES mRNA的表达:图像分析显示,同型半胱氨酸组、二硫代氨基甲酸吡咯烷预处理组的积分吸光度值分别为18 790和16 420,分别为对照组(积分吸光度值为12 680)的1.48倍和1.29倍.②脐静脉内皮细胞中RANTES蛋白的表达:图像分析显示,同型半胱氨酸组RANTES蛋白印迹条带的积分吸光度值为0.794 2,而二硫代氨基甲酸吡咯烷预处理组的积分吸光度值为0.501 3,分别是对照组(0.
作者：王淑秀；杨瑞；郭晓静
来源：中国临床康复 2006 年 10卷 45期
