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目的:对脂质体介导、反转录病毒载体介导、腺相关病毒载体介导这3种常用的基因转染方法进行比较,寻找一种适合于骨髓间充质干细胞的基因转移方法.方法:实验于2004-10/2005-06在首都医科大学北京神经科学研究所完成.①在脂质体介导下,将增强的绿色荧光蛋白基因导入骨髓间充质干细胞,然后通过G418抗性筛选,观察转染效率.②反转录病毒介导的基因转染,首先利用LipofectAMINETM 2000转染包装细胞系PT67,获得重组反转录病毒上清,然后用病毒上清直接感染骨髓间充质干细胞.转染后的细胞同样用G418筛选,得到阳性克隆后进行定点消化、扩增.③在腺相关病毒介导的基因转染过程中,首先通过磷酸钙沉淀法转染包装细胞系HEK293,得到重组AAV-LacZ病毒颗粒直接感染骨髓间充质干细胞,1周后进行β-gal染色,计算转染效率.结果:①脂质体介导的基因转染24 h后在荧光显微镜下观察,可见少量细胞呈现绿色荧光蛋白阳性,阳性率大约为5
作者：鲁玲玲；赵焕英；赵春礼；孙晓红；段春礼；杨慧
来源：中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 3期
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