目的:观察大鼠脂肪间充质干细胞经成骨诱导向成骨细胞分化的生物学特性,探讨其作为骨组织工程种子细胞的可行性.方法:实验于2004-07/2006-03在中南大学湘雅manbet官网登录
中心实验室完成主要工作.①取健康SD大鼠双侧腹股沟区脂肪垫,消化法分离出脂肪间充质干细胞,接种入含有体积分数为0.1的新生牛血清的低糖DMEM培养基进行原代培养.②取第3代的脂肪间充质干细胞,用含有体积分数为0.1的新生牛血清、0.1μmol/L地塞米松、50μmol/L抗坏血酸、10 mmol/L β-甘油磷酸钠的高糖DMEM培养基诱导其向成骨细胞分化.③于3,5,7,10,12,14,21 d分别采用倒置显微镜观察细胞形态及增殖情况、Gomori改良钙钴法碱性磷酸酶染色、茜素红S钙结节染色和Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色检测脂肪间充质干细胞成骨分化的情况.结果:①脂肪间充质干细胞原代细胞呈成纤维细胞样长梭形外观,传代稳定,细胞形态均一.②经成骨诱导,脂肪间充质干细胞体积增大,呈多角形;成骨诱导14 d,Gomori改良钙钴法碱性磷酸酶染色,细胞胞浆内可见浅棕色至棕黑色的颗粒,平均染色阳性率为80
作者:张胜利;邓展生;李宝军;郭晓柠;高嵩涛;沈民仁
来源:中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 6期