目的:分析人骨髓间充质干细胞分离、纯化、体外扩增及其向软骨细胞分化的条件,为人骨髓间充质干细胞用于修复损伤的软骨组织提供依据.方法:实验于2005-03/2006-04在南昌大学医学院生化与分子生物学教研室完成.实验材料:无菌条件下采集无血液系统疾病和家族遗传史的28～65岁成人骨髓8份,进行骨髓间充质干细胞分离与培养,骨髓采集经患者及manbet官网登录
同意,并签署知情同意书.实验方法:取第3代对数生长期骨髓间充质干细胞,实验组使用特定的、内含2 mg/L胰岛素、3 mg/L转铁蛋白、1 mmol/L丙酮酸、100 nmol/L地塞米松和10μg/L转化生长因子β1的低糖DMEM培养基诱导人骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化,对照组细胞以低糖DMEM基础培养液培养.倒置显微镜下观察细胞形态,诱导7,14 d采用半定量RT-PCR方法检测细胞软骨特异性Ⅱ型胶原表达,蕃红花O-亮绿染色分析蛋白多糖粘多糖含量,观察细胞分化情况.结果:①光镜观察成人骨髓间充质干细胞的形态变化:培养7 d细胞集落明显,集落中央为数个至数十个圆形细胞,周围变形细胞围绕中央细胞呈放射状生长.培养14 d细胞呈平行状或旋涡状排布,细胞排列紧密.②骨髓间充质干细胞向软骨细胞的诱导分化:实验组细胞生长较对照组慢,培养7 d后细胞大多呈椭圆形或三角形,部分细胞伸出似触角突起,培养
作者：万福生；周红辉；刘卓琦；张少容
来源：中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 20期
