目的:应用组织工程技术,建立体外诱导人骨髓间充质干细胞,与纳米晶羟基磷灰石/胶原骨共培养的人工骨模型,探求细胞与纳米晶胶原基骨结合的最佳模式.方法:实验于2005-09/2006-09在江苏大学医学技术学院中心实验室完成.①实验材料:纳米晶胶原基骨材料由清华大学材料系崔福斋等人研制.骨髓取自骨科取髂骨患者(男性,30岁,患者知情同意).②实验干预:全骨髓法体外培养骨髓间充质干细胞并扩增,应用成骨诱导剂诱导向成骨细胞表型转化.取纳米晶胶原基骨材料经60Co照射灭菌,无水乙醇疏水化,三蒸水洗去乙醇等处理制备支架材料.细胞与支架材料复合培养.③实验分组:骨髓间充质干细胞培养至第3代后分为两组:复合材料后加成骨诱导剂组:骨髓间充质干细胞先与纳米晶胶原基骨复合培养3 d后再加入成骨诱导剂;成骨细胞复合材料组:骨髓间充质干细胞在诱导成骨细胞后与纳米晶胶原基骨复合培养.④实验评估:记录第3代骨髓间充质干细胞生长曲线.将诱导后细胞分别进行碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色.扫描电镜比较两组复合物经体外孵育2周后,细胞在其中生长情况.结果:①细胞生长情况:倒置显微镜下观察原代培养的骨髓细胞增殖迅速,基本都呈形态均一成纤维样细胞,10～12 d左右即可长满,并可稳定传代,传代细胞7～9 d即可传代.诱导培养后
作者：夏青；沈铁城；黄永辉；许文荣
来源：中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 23期
