目的:研究证实三七总皂甙能促进骨髓间质干细胞向神经细胞的横向分化,但分化细胞能否表达神经递质?存活时间是否延长?采用三七总皂甙对大鼠骨髓间质干细胞进行体外诱导,并检测分化的神经元样细胞表型特征、凋亡蛋白表达及存活情况.方法:实验于2006-01/2007-01在安徽医科大学实验中心完成.①实验方法:脱颈椎法快速处死大鼠,取股骨,剪断骨两端,IMDM冲洗骨髓腔,分离培养骨髓间质干细胞.取第5代细胞,用含体积分数为0.2胎牛血清、1 mmol/L 2巯基乙醇的完全培养液预诱导24 h,然后更换含不同诱导剂的无血清培养液诱导分化,设立3组:三七总皂甙组的诱导剂含2.0 g/L 三七总皂甙,2巯基乙醇+丁羟茴醚组的诱导剂含200 μmol/L 丁羟茴醚+10 mmol/L 2巯基乙醇,空白对照组不添加任何诱导剂.②实验评估:观察诱导期间细胞形态变化及分化细胞的存活时间.免疫细胞化学检测分化的神经元样细胞表型特征及凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达情况,并采用TUNEL法检测细胞凋亡指数.结果:①加入三七总皂甙诱导后约2 h可见细胞胞质收缩,逐渐有突起形成.约5 h后多数细胞呈明显的神经元样细胞形态,胞体呈圆形,突起较长,双极或多极形,在突起末端出现分支,部分相邻细胞的突起连接成网.②2巯基乙醇+丁羟茴醚诱导8 h后即有部分细胞贴壁,但不牢靠,
作者：施雪英；陈先文；袁良津；方毅；周力军；胡慧敏
来源：中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 42期
