目的:研究表明,星形胶质细胞产生一系列可溶性因子和膜相关因子,对中枢神经系统的发育和功能的成熟起了重要的作用.将星形胶质细胞和神经干细胞在互不接触的情况下进行共培养,探讨星形胶质细胞对神经干细胞分化的影响.方法:实验于2005-03/2006-02在广西医科大学实验中心完成.①实验材料:生后0-2 d新生SD大鼠由广西医科大学实验动物中心提供.②实验方法:分离培养新生大鼠海马神经干细胞.采用化学法、差速贴壁法和振荡法分离纯化新生大鼠脑组织星形胶质细胞,以胶质纤维酸性蛋白标记星形胶质细胞,应用免疫细胞化学染色法进行细胞纯度鉴定.将星形胶质细胞和神经干细胞在互不接触的情况下进行共培养:共培养组是将培养瓶中的星形胶质细胞用胰蛋白酶消化成单细胞悬液,加入完全培养液,待细胞均匀长满后,换神经干细胞基础培养液,孵育24 h后,将涂有多聚赖氨酸的盖玻片放入6孔板中,将传代1个月的神经干细胞球种到盖玻片上,同时更换神经干细胞基础培养液继续培养.对照组是单纯接种神经干细胞球于置有多聚赖氨酸涂布盖玻片的6孔培养板内.③实验评估:采用免疫细胞化学染色法观察神经干细胞分化后神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白和酪氨酸羟化酶表达.结果:纯化的星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白抗体标记阳性,细胞纯
作者：罗杰峰；黎海燕；沈岳飞
来源：中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 42期
