背景:目前国内骨髓库主要采用分辨率较高的聚合酶链反应-寡核苷酸探针分型反向杂交荧光微珠法,该方法在提高分辨率的同时,使部分隐藏新基因的标本的检测结果表现为摸棱两可,对该可疑标本进行确认最简便的方法是DNA测序HLA分型检测.目的:应用DNA测序方法确认HLA-DRB1位点1个新等位基因.设计、时间及地点:常规初检于2005-11在河南血液中心中国骨髓库河南分库HLA组织配型实验室完成.测序实验于2006-04在美国海军骨髓库HLA实验室完成.材料:中国造血干细胞捐献者初检结果可疑为新基因的重采血样5 mL.方法:采用聚合酶链反应-寡核苷酸探针分型流式微珠杂交技术对中华造血干细胞捐献者进行HLA中低分型检测,对可疑为新等位基因的样本进行DNA测序分析,通过EBI(http://www.ebi.ac.uk/)和NCBI(hap:Hwww.ncbi.nlm.nih.gov/)将测序结果与已知的人类白细胞抗原(human leukoyte antigen,HLA)等位基因序列进行比较分析,以确认是否为新的基因序列.主要观察指标:测序结果与已知HLA等位基因序列的比较分析.结果:样本HLA-DRB1位点中低分型结果的初检、复检反应格局与分析软件数据库中HLA-DRB1等位基因的模板谱型均不匹配.样本DRB1*11XX第2外显子序列与所有已知等位基因序列均不一致,与DRB1*110401的同源性高达99
作者：杜广有；张伯伟；赵磊；杜娟
来源：中国组织工程研究与临床康复 2008 年 12卷 29期
