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背景:目前并没有特定的实验对骨髓间充质干细胞分离的两种基本方法进行系统评估,所以贴壁分离法和密度梯度离心法对细胞诱导分化是否存在不同影响,尚无定论.目的:拟验证两种基本分离方法对骨髓间充质干细胞成软骨分化影响的差别.设计、时间及地点:对照观察实验,2005-03/09在中国医科大学附属盛京manbet官网登录 儿外实验室完成.材料:2~3月龄体质量1.2~2.0 kg的日本大耳兔20只用于抽取骨髓. 方法:用贴壁分离法和密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞.选择两组同代的骨髓间充质干细胞,用转化生长因子β1诱导其向软骨方向分化.主要观察指标:①倒置显微镜观察骨髓间充质干细胞的生长情况,绘制两组细胞生长曲线.②免疫组化检测两组Ⅱ型胶原表达.③原位杂交检测两组细胞Ⅱ型胶原mRNA表达.结果:绘制生长曲线表明两组细胞生长速度趋于一致.免疫组化法检测两种方法分离的骨髓骨髓间充质干细胞的软骨细胞分化率为76.1

作者:王广斌;付勤;杨礼庆;付永慧

来源:中国组织工程研究与临床康复 2008 年 12卷 38期

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王广斌;付勤;杨礼庆;付永慧
来源:
中国组织工程研究与临床康复 2008 年 12卷 38期
标签:
骨髓 间充质干细胞 Ⅱ型胶原 软骨分化 分离培养方法 贴壁分离法 密度梯度离心法
背景:目前并没有特定的实验对骨髓间充质干细胞分离的两种基本方法进行系统评估,所以贴壁分离法和密度梯度离心法对细胞诱导分化是否存在不同影响,尚无定论.目的:拟验证两种基本分离方法对骨髓间充质干细胞成软骨分化影响的差别.设计、时间及地点:对照观察实验,2005-03/09在中国医科大学附属盛京manbet官网登录 儿外实验室完成.材料:2~3月龄体质量1.2~2.0 kg的日本大耳兔20只用于抽取骨髓. 方法:用贴壁分离法和密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞.选择两组同代的骨髓间充质干细胞,用转化生长因子β1诱导其向软骨方向分化.主要观察指标:①倒置显微镜观察骨髓间充质干细胞的生长情况,绘制两组细胞生长曲线.②免疫组化检测两组Ⅱ型胶原表达.③原位杂交检测两组细胞Ⅱ型胶原mRNA表达.结果:绘制生长曲线表明两组细胞生长速度趋于一致.免疫组化法检测两种方法分离的骨髓骨髓间充质干细胞的软骨细胞分化率为76.1