背景:既往研究倾向于分析骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,以及分化过程中的影响因素,涉及成骨细胞对骨髓间充质干细胞分化影响的报道较少.目的:在与成骨细胞共培养的条件下,观察大鼠骨髓间充质干细胞的成骨特性.设计、时间及地点:细胞学体外对比观察,于2007-01/08在广州中医药大学附属骨伤科manbet官网登录
细胞室完成.材料:1 d龄清洁级SD乳鼠10只,购自中山大学动物实验中心;3月龄SPF级SD大鼠6只,购自广州中医药大学动物实验中心.Transwell双层细胞培养板为Coming公司产品.方法:取SD乳鼠颅盖骨,胰蛋白酶+胶原酶多次消化分离培养扩增成骨细胞.取SD大鼠股骨和胫骨,用DMEM培养液冲洗骨髓腔,冲出液体过滤后按1:1滴加于淋巴细胞分离液上层,离心吸取液面交界处的单个核细胞,调整骨髓间充质干细胞浓度为1×10S/cm,接种后胰蛋白酶消化扩增.Transwell双层细胞培养板的隔膜孔径为0.4 μ m,共培养组于培养上室接种成骨细胞,对照组培养上室未接种细胞,两组培养下室均于预处理的盖玻片上接种骨髓间充质干细胞,培养20 d.主要观察指标:酶联免疫吸附法检测培养上清中骨形态发生蛋白2含量、骨碱性磷酸酶活性、骨钙素含量及钙化结节数.结果:与对照组比较,第15天共培养组上清中骨形态发生蛋白2的含量显著升高(P<0.01),第20天共培养组
作者:庄洪;徐无忌
来源:中国组织工程研究与临床康复 2008 年 12卷 47期