背景:可注射性纤维蛋白凝胶为软骨缺损组织工程完全再生修复的临床应用带来了新的方向,其降解速度的调控是其中的关键问题之一.目的:在可注射性纤维蛋白凝胶中引入不同浓度的抑肽酶和氨甲环酸,观察其对纤维蛋白凝胶支架降解速率的影响.设计、时间及地点:体外细胞学实验,于2008-02/08在广东省构建与检测实验室进行.材料:以纤维蛋白原、凝血酶及氯化钙制备纤维蛋白凝胶.方法:取3周龄新西兰幼兔的关节软骨制取软骨细胞,体外单层培养、扩增后植于标准纤维蛋白凝胶支架和改良纤维蛋白凝胶支架(加入抑肽酶7 500,12500,17500MIU/L及氨甲环酸15,20,25g/L复合液)上,进行体外培养、扩增6周.主要观察指标:支架降解情况.结果:支架细胞复合物体外培养3周时,标准组已完全崩解,改良各组体积尚不到原来1/2.培养6周时仍能保持其一定的外形,具有一定的厚度及弹性.不同浓度的抑肽酶和氨甲环酸,在体外环境下均显著地减缓了纤维蛋白胶的降解速度,低于1 2500 MIU/L的抑肽酶和20 g/L氨甲环酸对软骨细胞的繁殖、表型的维持、基质的分泌无明显不良影响,而高于此浓度的抑肽酶和氨甲环酸的加入明显抑制了细胞的增殖、表型的维持和基质的分泌.结论:通过调节纤维蛋白凝胶中抑肽酶和氨甲环酸的含量,可实现对纤维蛋白凝胶降解速度的调控.
作者:王九现;朱立新;靳安民;张世浩;黄锐;兰小勇
来源:中国组织工程研究与临床康复 2008 年 12卷 49期