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背景:近年来研究发现食管癌细胞中存在DNA 聚合酶β的突变.目的:观察互隔交链孢酚对NIH/3T3 细胞中DNA 聚合酶β基因序列的影响,研究互隔交链孢酚致细胞变异的机制.方法:用不同浓度(2,4,6,8 μmol/L)的互隔交链孢酚作用于NIH/3T3 细胞,并设置对照组.用RT-PCR 法从细胞总RNA中扩增出DNA 聚合酶β基因cDNA 序列,应用T-A 克隆技术,克隆至pGEM-T 载体后进行测序,分析其序列变化.结果与结论:2 μmol/L 互隔交链孢酚处理后的细胞内DNA 聚合酶β基因序列无任何变化.而4 μmol/L 组中DNA 聚合酶β基因有1 个位点发生突变,8 μmol/L 组和16 μmol/L 组中各有2 个位点发生突变,此3 组的突变存在相同的位点.结果证实,互隔交链孢酚可导致NIH/3T3 细胞中的DNA 聚合酶β发生点突变,互隔交链孢酚浓度越高,点突变的数量越多,且存在突变活跃位点.
作者：朱涵；樊红琨；章茜
来源：中国组织工程研究 2012 年 16卷 15期
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