背景:分离培养鼠、兔骨髓间充质干细胞的科研实践较多,而组织工程临床实践大多以同种属种子细胞的科研为基础.目的:建立一种稳定、高效,满足临床和实验室需要的人骨髓间充质干细胞分离培养方法.
方法:使用骨穿针于人髂前上棘处抽取骨髓和松质骨,用15 mL 培养体系冲洗松质骨并收集冲洗液,采用直接培养法,利用细胞贴壁性能初筛细胞;流式细胞仪检测细胞表面抗原(CD29、CD34、CD44、CD45、CD105),分别进行成骨、成脂肪诱导分化,在诱导过程中进行细胞形态学观察对干细胞进行初步鉴定.
结果与结论:松质骨冲洗液直接培养法在培养第5天的时候出现细胞集落,细胞稳定表达 CD29、CD44、CD105,不表达 CD34、CD45.成骨诱导20 d 后出现明显钙结节,茜素红染色呈红色结节.成脂诱导7 d 后脂滴明显形成,油红素 O 染色见大量脂质沉淀.结果可见采用松质骨冲洗液直接培养法可以从人松质骨中短时间内获得大量间充质干细胞,其具有良好的细胞形态,稳定表达的细胞抗原及成骨、成脂分化能力.
作者：刘继春；胡红涛；许国华；蒋玉权；徐宁；叶晓健
来源：中国组织工程研究 2012 年 45期
