背景:肝细胞生长因子是体外诱导骨髓间充质干细胞向肝干细胞方向分化的关键性细胞因子.碱性成纤维细胞生长因子不仅能提高骨髓间充质干细胞的增殖速度及其寿命,且能在增殖过程中保留骨髓间充质干细胞的多向分化潜能.目的:探讨肝细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞的可行性.方法:取大鼠股骨骨髓,用直接贴壁法分离纯化骨髓间充质干细胞并体外传代,流式细胞仪及成骨诱导对骨髓间充质干细胞进行鉴定.将细胞按以下分组进行成肝诱导: M①0组:不添加任何因子. M②1组:20μg/L肝细胞生长因子.③2组:20μg/L肝细胞生长因子+5μg/L碱性成纤维细胞生长因子. M④3组:20μg/L 肝细胞生长因子+10μg/L碱性成纤维细胞生长因子. M⑤4组:20μg/L肝细胞生长因子+20μg/L碱性成纤维细胞生长因子.倒置显微镜下观察细胞形态变化,在不同分化阶段用免疫细胞化学染色法检测不成熟肝细胞表型标志甲胎蛋白和成熟肝细胞表型标志细胞白蛋白的表达.M结果与结论:骨髓间充质干细胞诱导后呈肝样细胞形态改变.甲胎蛋白在诱导第7天细胞基本为阳性着色,在诱导第14天时表达降低,21 d表达为阴性.细胞白蛋白在诱导第14天细胞开始表达,而后持续.M0对照组未见阳性染色,同一时间点,M3、M4组细胞阳性
作者：陈鹏飞；魏文斌；谭远忠；胡晟
来源：中国组织工程研究 2012 年 49期
