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背景:骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,且可大量体外扩增培养,是重要的组织工程种子细胞.但尚无统一的体外培养及定向诱导方法.目的:探讨体外定向诱导兔骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞的可行性.方法:应用密度梯度离心法从兔四肢骨中分离纯化间充质干细胞,应用密度为1.073 g/mL 的 Percol分离液,3000 r/min×30 min 离心,区别于相关报道的 Ficol 分离液,2000-2500 r/min×(20-30) min离心以及全骨髓培养法体外扩增至第3代,分别在普通培养基(对照组)和成骨诱导培养基(实验组)中培养.结果与结论:成功获得大量高纯度骨髓间充质干细胞.经成骨诱导后,实验组骨钙素含量明显高于对照组(P <0.05).实验组碱性磷酸酶和钙结节染色阳性,对照组均阴性.结果表明使用密度梯度离心法可成功建立兔骨髓间充质干细胞的分离培养体系,骨髓间充质干细胞可定向诱导为成骨细胞.

作者:庾佳佳;汪新柱;赵琳;孙瑞;闫雪萍;张苍宇;任广铁;拓振合

来源:中国组织工程研究 2013 年 6期

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庾佳佳;汪新柱;赵琳;孙瑞;闫雪萍;张苍宇;任广铁;拓振合
来源:
中国组织工程研究 2013 年 6期
标签:
干细胞 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞 密度梯度离心法 分离培养 成骨诱导 骨组织工程 兔 国家自然科学基金 干细胞图片文章
背景:骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,且可大量体外扩增培养,是重要的组织工程种子细胞.但尚无统一的体外培养及定向诱导方法.目的:探讨体外定向诱导兔骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞的可行性.方法:应用密度梯度离心法从兔四肢骨中分离纯化间充质干细胞,应用密度为1.073 g/mL 的 Percol分离液,3000 r/min×30 min 离心,区别于相关报道的 Ficol 分离液,2000-2500 r/min×(20-30) min离心以及全骨髓培养法体外扩增至第3代,分别在普通培养基(对照组)和成骨诱导培养基(实验组)中培养.结果与结论:成功获得大量高纯度骨髓间充质干细胞.经成骨诱导后,实验组骨钙素含量明显高于对照组(P <0.05).实验组碱性磷酸酶和钙结节染色阳性,对照组均阴性.结果表明使用密度梯度离心法可成功建立兔骨髓间充质干细胞的分离培养体系,骨髓间充质干细胞可定向诱导为成骨细胞.