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@@@@背景:研究发现共培养可诱导人源干细胞向特定细胞分化,但如何控制两种细胞间比例以最大效率获得目的细胞是研究中的难题。目的:观察人脐血间充质干细胞与兔软骨细胞按不同比例共培养后向软骨细胞分化的情况。方法:复苏人脐血间充质干细胞并进行传代,将经流式细胞仪鉴定的人脐血间充质干细胞与体外分离的兔软骨细胞按照2∶1或3∶1的比例共培养,并用100μg/L的胰岛素样生长因子1进行诱导。在共培养14 d,提取细胞RNA和蛋白质,实时定量PCR检测聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA的表达,Western blot检测聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原蛋白的表达。结果与结论:人脐血间充质干细胞与兔软骨细胞共培养14 d,共培养的细胞聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA及蛋白的表达高于单纯胰岛素样生长因子1诱导的细胞。在人脐血间充质干细胞与软骨细胞比例相同时,加入胰岛素样生长因子1可提高细胞聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA及蛋白的表达。同时人脐血间充质干细胞与兔软骨细胞按3∶1共培养更能促进细胞Ⅱ型胶原mRNA和蛋白及聚集蛋白多糖蛋白的表达;而按2∶1共培养时,细胞聚集蛋白多糖mRNA表达更多。可见人脐血间充质干细胞与兔软骨细胞共培养后可诱导人脐血间充质干细胞向软骨细胞分化,且按3∶1的比例共培养可获得更多的软骨

作者:郑朋飞;陈雷;董展;蒋立;鞠黎;王儒法;楼跃

来源:中国组织工程研究 2013 年 23期

知识库介绍

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郑朋飞;陈雷;董展;蒋立;鞠黎;王儒法;楼跃
来源:
中国组织工程研究 2013 年 23期
标签:
干细胞 脐带脐血来源干细胞 软骨细胞 共培养 胰岛素样生长因子 Ⅱ型胶原 聚集蛋白多糖 软骨缺损 软骨组织工程 种子细胞 其他基金 stem cel s umbilical cord/umbilical cord blood stem cel s chondrocytes co-culture insulin-like growth factor-1 col agen type Ⅱ aggrecan cartilage defects cartilage tissue engineering seed cel s other grants-supported paper
@@@@背景:研究发现共培养可诱导人源干细胞向特定细胞分化,但如何控制两种细胞间比例以最大效率获得目的细胞是研究中的难题。目的:观察人脐血间充质干细胞与兔软骨细胞按不同比例共培养后向软骨细胞分化的情况。方法:复苏人脐血间充质干细胞并进行传代,将经流式细胞仪鉴定的人脐血间充质干细胞与体外分离的兔软骨细胞按照2∶1或3∶1的比例共培养,并用100μg/L的胰岛素样生长因子1进行诱导。在共培养14 d,提取细胞RNA和蛋白质,实时定量PCR检测聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA的表达,Western blot检测聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原蛋白的表达。结果与结论:人脐血间充质干细胞与兔软骨细胞共培养14 d,共培养的细胞聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA及蛋白的表达高于单纯胰岛素样生长因子1诱导的细胞。在人脐血间充质干细胞与软骨细胞比例相同时,加入胰岛素样生长因子1可提高细胞聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA及蛋白的表达。同时人脐血间充质干细胞与兔软骨细胞按3∶1共培养更能促进细胞Ⅱ型胶原mRNA和蛋白及聚集蛋白多糖蛋白的表达;而按2∶1共培养时,细胞聚集蛋白多糖mRNA表达更多。可见人脐血间充质干细胞与兔软骨细胞共培养后可诱导人脐血间充质干细胞向软骨细胞分化,且按3∶1的比例共培养可获得更多的软骨