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背景：目前较常应用的原代髓核细胞培养方法，多应用Ⅱ型胶原酶联合胰酶消化法、单纯Ⅱ型胶原酶消化法等，但这些方法获取细胞数量偏少存在一定的缺限。目的：利用改良简易传统的方法从人退变椎间盘获取髓核细胞。方法：分离培养髓核细胞，每日倒置相差显微镜下观察髓核细胞形态，取原代和传代细胞培养悬液进行锥虫蓝细胞活性检测，分别于第1，3，5，7，9，11，13天采用 MTT 法测细胞生长情况，激光扫描共聚焦显微镜观察细胞形态。结果与结论：成功分离出髓核细胞，成功传至 P3代。原代细胞生长为梭形，P1及 P2传代细胞形态多呈三角形或多角形，类似成纤维细胞形态，接近融合时呈铺路石样外观。锥虫蓝染色细胞活力测定原代分离时活力为99
作者：王海；黄博；周跃；王建；李长青
来源：中国组织工程研究 2013 年 28期
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