背景：L 型钙通道作为电压依赖式钙通道的一种，是细胞外钙离子进入细胞内的主要途径，在维持细胞的形态及生理活动上起重要作用，具有单通道电导较大，通道衰减较慢，通道开放持续时间较长的特点，以往研究表明碱性成纤维细胞生长因子能够促进体外培养的软骨细胞的增殖。<br> 目的：利用膜片钳技术探讨L型钙通道在碱性成纤维细胞生长因子对软骨细胞增殖分化调控中的作用。<br> 方法：取3日龄新西兰兔关节软骨细胞，培养至第2代后，随机分为实验组和对照组，关节软骨细胞分别在含有10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子及不含生长因子的培养液中培养。采用膜片钳记录L型钙通道在碱性成纤维细胞生长因子作用下的开放情况。然后采用激光共聚焦显微镜观察碱性成纤维细胞生长因子培养2周后软骨细胞内游离钙离子浓度。最后用Cel Titer单溶液细胞增殖反应试剂盒分析连续培养8 d软骨细胞增殖情况和免疫组织化学染色方法观察培养10 d后软骨细胞合成Ⅱ型胶原情况。<br> 结果与结论：碱性成纤维细胞生长因子对 L 型钙通道的开放有一定的抑制作用，导致细胞内游离钙离子浓度降低(P <0.01)。碱性成纤维细胞生长因子培养的软骨细胞与常规条件下培养的软骨细胞相比细胞数量增多(P <0.01)，Ⅱ型胶原染色面积明显增
作者：王强；何金山；熊传芝；冯新民；王静成；颜连启；陈鹏涛；蔡俊
来源：中国组织工程研究 2013 年 50期
