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背景：抑制椎间盘细胞的凋亡可以延缓椎间盘的退变，而生存素具有调节细胞增殖和抗凋亡功能。<br> 目的：构建人生存素基因的慢病毒载体。方法：应用全基因合成技术合成人生存素基因(BIRC5)，通过 PCR扩增目的基因并对 PCR 结果进行电泳分析。将目的基因克隆到慢病毒表达质粒构建重组慢病毒质粒 Lenti-BIRC5。将重组的慢病毒质粒转化细菌感受态细胞，PCR鉴定阳性的克隆进行基因测序。将含有目的基因的慢病毒质粒转染293T细胞，应用Western blot技术对重组慢病毒载体 Flag-Survivin 融合蛋白的表达进行检测。<br> 结果与结论：PCR鉴定及基因测序结果显示成功构建了含有人Survivin基因的慢病毒表达载体，Western blot检测结果显示目的基因在体外培养细胞中转染成功并且过表达。说明慢病毒表达载体Lenti-BIRC5构建成功，这为下一步研究Survivin在人髓核细胞中的抗凋亡作用提供了载体。
作者：赵亮；张国庆；马学晓；杨堃；胡有谷；陈伯华
来源：中国组织工程研究 2014 年 11期
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